DNA实验“断案”:村民偷猎斑羚 剥皮肢解掩耳目
华西都市报记者肖茹丹实习生赵诗柯
悬疑 家养山羊?野生斑羚?剥皮去骨之后两难分
求助 DNA鉴定,凭火柴头大小的肉丁确定是什么
一次典型DNA实验
检测仪器:恒温水浴锅高速冷冻离心机PCR仪等
实验方法:酚氯仿经典法DNA抽提
实验单位:四川农业大学生命科学学院实验室
实验目的:确定被肢解的动物种类
去年12月的一天,阳光拨开密林照到山间小溪,两名男子蹲坐四川省绵竹市金花镇三江村一处山沟,将猎捕来的两只野生动物剥皮、肢解。
两人以为,这样一来,只要咬定这是两只普通的山羊,就能掩人耳目。他们没想到的是,警方将两人挡获,随即将动物尸体送检。四川农业大学生命科学学院实验室通过DNA鉴定实验,从一块小肉丁,到提取DNA,再到数据库比对,最终确定两只被剥皮的动物是斑羚,为国家二级重点保护野生动物。
目前,根据实验结果,两人因涉嫌非法猎捕、杀害珍贵濒危野生动物,已移交绵竹市检察院起诉。
办案僵局/
村民猎杀斑羚 剥皮肢解掩耳目
去年12月14日,家住什邡市和绵竹市交界的李林约好友王强一起上山采药,走在山间小径上,草丛中的粪便和脚印引起了他们的注意。李林走近一瞧,这组脚印形似剪刀,和家养山羊的脚印颇为相似。
“逮两只回去吃!”两人不谋而合。随即,王强拿出随身携带的绳子,挽成圈,做成了三个圈套,并用杂草覆盖,引“羊”入套。
三天后,两人再次相约上山,查看三个圈套中有无猎物。上山后,他们远远地看到圈套位置有两只动物,已经死亡。尸体皮毛呈灰色,形似山羊,但四肢比较粗短,角也比较长。李林和王强把“猎物”装进尼龙袋里。
下山途中,两人商议将皮子剥了,既方便搬运,又能掩人耳目。在一处山沟,两人用弯刀将尸体剥皮、肢解,并将犄角等扔在了现场。让他们没想到的是,两人刚下山,就撞上了正在巡逻的绵竹市公安局金花镇派出所民警,肢解的动物尸体现场被扣押,并移交给了绵竹市森林公安。
据两人事后交代,他们当时已经意识到猎捕的这两只动物可能是保护动物,但因为皮毛不存、血肉模糊,两人一口咬定这只是普通的山羊。警方为确定这两只动物的具体种类,绵竹市森林公安只得按程序做DNA鉴定实验。
实验求证/
火柴头大小“肉丁” 提取DNA沉淀物
两只动物尸体被送往了四川楠山林业司法鉴定中心,随即被转送至四川农业大学生命科学学院的实验室做DNA鉴定实验。
在做好了实验前的无菌准备后,实验人员从动物腿部剪下一块火柴头大小的肉丁,剪碎成末,倒入装有生理盐水的离心管中进行浸泡清洗,又加入了细胞裂解缓冲液等试剂,用以分解细胞,消化部分蛋白质。四川农业大学生命科学学院徐怀亮教授说,细胞中的DNA是与蛋白质、糖类等其他物质混杂在一起,为了纯化DNA,必须去除蛋白质。
接下来,实验人员将离心管置入恒温水浴锅里过夜。第二天,实验人员又将事先调配好的酚氯仿混合溶液滴入离心管中。如此一来,即可去除细胞中不需要的糖类、蛋白质等,只留下DNA。
接下来,在离心机的高速运转下,管内出现了“两极分化”:上层是清液,下层是沉淀物。反复多次分离实验后,再经过酒精、冷冻、离心机分层等步骤,管底出现了一些白色沉淀物——这就是DNA。最后,实验人员将上层清液吸出,在室温环境中静置30分钟,等酒精挥发3个小时,就是纯化后的DNA。
数据库比对
“猎物”确为二级保护动物
提取到最终的DNA后,实验人员又对其加入灭菌水溶解,放进冰箱保存备用。而后通过专业的检测仪器,将一个小小的DNA片断扩增至1000万倍以上制成数据。在经过序列测定获得DNA序列后,与已有的数据库比对。最终确定李林和王强所捕杀的“野羊”是国家二级重点野生保护动物斑羚。
“DNA片断上都搭载着每个物种独一无二的信息,就像动物的身份证,因此一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA的鉴定工作,”徐怀亮透露,目前四川农大生命科学学院实验室的DNA数据库有数百种动物资料,包括大熊猫、金丝猴、黑熊、绿尾虹雉、红腹锦鸡等多种珍稀动物。
根据实验结果,最终确定两只被剥皮的是斑羚,为国家二级重点保护野生动物。李林和王强也因涉嫌非法猎捕、杀害珍贵濒危野生动物罪,移交绵竹市检察院起诉。(文中犯罪嫌疑人为化名)
DNA鉴定,为何神准
“DNA片断上都搭载着每个物种独一无二的信息,就像动物的身份证,因此一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA的鉴定。”——四川农业大学生命科学学院徐怀亮教授