分光光度法测定碘硝酚注射液的含量

分光光度法测定碘硝酚注射液的含量

    碘硝酚（2,6- 二碘- 4- 对硝基酚） 英文名为DISOPHENOL（2,6- diiodo- 4- nitrophenol），是驱虫药，用于羊线虫、羊鼻蝇蛆、螨和蜱感染，具有广谱、高效、长效、方便等优点。我国于1991 年开发研制出该药，1995 年由农业部批准沈阳市兽药厂生产。注射液中的碘硝酚含量测定，1996年农业部兽药质量标准采用分光光度法，取样方法为精密量取样品。因为碘硝酚注射液黏度大，易造成取样误差，导致结果误差大。本方法改为精密称取样品并同时测定其相对密度，操作可行，结果准确。

  1 仪器与试药

  1. 1 仪器：日本岛津1601 分光光度计，德国AE260 电子天平。

  1. 2 试药：碘硝酚原料由沈阳市兽药厂提供，批号为20030306，含量为98.8%；碘硝酚注射液由沈阳市兽药厂提供，批号为20030120、20030218、20030220；氢氧化钠、聚乙二醇、苯甲醇均为分析纯试剂。

  2 分析方法

  2. 1 含量分析方法：精密称取碘硝酚注射液适量（约相当于碘硝酚0.2 g），置250 ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取5 ml，置250 ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。根据分光光度法，在407 nm 波长处测定吸收度；另取本品，同时测定相对密度，将供试品重量折算成ml 数，按碘硝酚的吸收系数为411 计算，即得。

  2. 2 含量准确度的考察：取碘硝酚原料，配制处方浓度的80%、100%、110%，按标准各测定3 次（每次5 平行），计算碘硝酚原料的含量，结果见表1。

      从表1 得知碘硝酚原料按分光光度法法测定含量均值为98.4%，按容量法测定含量为98.8%，差值为0.4%，说明两方法基本一致，无显著差异。

    2. 3 回收率及专属性的考察：取碘硝酚原料，按碘硝酚注射液工艺配制处方浓度的80%、100%、110%，按标准各测定3 次（每次5 平行），以原料做对照品，在407 nm 波长处测定吸收度，计算回收率。结果见表2，回收率在99.6%～100.9%之间，RSD<2%。同时，按处方配制不含碘硝酚的阴性空白样，与样品同法测定，阴性空白样吸收度为零。证明处方中辅料对方法无干扰，方法可行。

    2. 4 精密度的考察：取碘硝酚注射液（批号为20030120沈阳市兽药厂生产）按标准测定含量（批内5 平行，批间5平行），计算含量，结果见表3。从表3 可见，RSD 为0.45%，说明本方法的精密度良好。

    2. 5 稳定性的考察：取精密度考察第5 次的样品溶液（批内5 平行），放置19 h，24 h，26 h，测定含量，结果由表4 可见，本方法在26 h 内稳定。

    2. 6 线性考察：取碘硝酚原料0.2 g，加0.05 mol/L 的氢氧化钠稀释至100.0 ml，取10.0 ml 加水稀释至100.0 ml，依次取0.5 ml；1.0 ml；1.5 ml；2.0 ml；2.5 ml；3.0 ml；3.5 ml；4.0 ml；4.5 ml；5.0 ml，加水稀释至50.0 ml，在407 nm 处测定吸收度，结果见表5。从表5 可以看出当浓度在1.964～19.640 ug/ml 时，吸收度在0.073～0.798 范围内，线性关系良好。相关系数r=0.9999，回归方程A=0.0407C- 0.0076 (C—碘硝酚的浓度)。

  2. 7 按本检验方法检测沈阳市兽药厂的产品3 批，均符合规定，具体数据见表6。

  3 讨论

  3. 1 取样范围确定本方法依线性、准确度、精密度的考察结果，本方法检测下限为零，上限为处方浓度的110%。因为浓度为110%时，吸收度已经在0.7 左右，浓度再增加，吸收度值超过0.7，不符合药典要求；另浓度太高时，碘硝酚不易溶解，注射液不好配制。

  3. 2 溶剂的选择：碘硝酚在水及酸性下基本不溶，故碘硝酚原料选择用0.05 mol/L 的氢氧化钠溶解；而碘硝酚注射液在配制过程中，pH 值要求在7.0～8.5，已经是碱性，故碘硝酚注射液用水溶解即可。